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　　小鼠單抗 Ig 類/亞類鑒定用 ELISA 試劑盒使用說明書 天津本生

　　試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養上清中單克降抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區分出IgG1\IgG2aIgG2bIgG3IgMgA)采用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板，與加入的培養上清中的小鼠抗體結合，再加入HRP標記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應，最后用 TMB 底物系統顯色并用稀硫酸終止，再通過酶標儀檢測吸光度來判斷被測單克降抗體的類或亞類。本試劑盒具的分辨率，是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。

　　二、組成成分:

　　酶標板含自封袋2個2x96 孔

　　標本稀釋液15m1通用陽性對照1.8ml

　　顯色劑A15m1

　　通用陰性對照1.8ml

　　顯色劑 B15m1

　　酶標二抗6種

　　6x4m1反應終止液

　　15m120x清洗液

　　50mL加樣圖2份

　　封板膜4 張說明書1份

　　三、使用范圍:用于培養上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關內容的研究。

　　四、使用方法:

　　1、首先將試劑盒恢復室溫(大約 30分)，然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加 19 份純水 )。

　　2、取出酶標板。每個標本需要6孔，陽性對照6孔，陰性對照6孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。

　　3、將標本檢測孔每孔先加入標本稀釋液各 5041。然后將5041細胞培養上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標微孔板，每個標本加6孔;陽性對照和明性對照孔不加標本稀釋液也是各加 6孔每孔 10041。貼上封板膜 37℃溫育30分鐘。

　　4、棄去板內液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標本的6孔中分別加入6種酶標二抗各 100%1，通用陽性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜 37℃溫育30分鐘。

　　5、吸棄板內液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各 5041，換一張新的封板膜貼板避光 37℃顯色 20分鐘。

　　6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結果，看顯色藍的那個孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。更可將反應終止液(每孔5041)終止反應后用酶標儀450mm測定波長，630mm參考波長雙波長測定結果，參看高值孔所對應的酶標二抗就知道此標本的 Ig類或亞類(陽性對照0D一般不小于 0.8，陰性對照一般不高于0.15，陽性判定標準:樣品 OD 大于陰性0D10.15，陰性0D低于0.05按0.05算)。

　　五、產品特點:高靈敏度、高特異性、結果容易判定。