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菌種保存管規范操作與關鍵要點
更新時間:2025-10-14瀏覽:187次

  菌種保存管規范操作與關鍵要點

  以下是關于菌種保存管使用方法的關鍵要點,結合關鍵步驟與常見注意事項:

  一、菌種保存管使用步驟

  材料準備?

  選擇聚丙烯材質凍存管,內含25顆多孔瓷珠及含低溫保護劑(如20%甘油)的保存液?。

  未使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存12個月,使用前需檢查是否漏液或保存液混濁?。

  菌懸液制備?

  挑取新鮮菌落配成3-4麥氏比濁度的菌懸液,接種至凍存管內?。

  擰緊管蓋后輕柔顛倒4-5次混勻,避免旋搖導致瓷珠破損?。

  保存條件?

  短期保存?:-20℃可維持1-5年菌種活性?。

  長期保存?:-80℃可延長至5-10年,液氮氣相(-150℃)或液相(-196℃)保存效果。




  二、關鍵注意事項

  操作規范?

  全程在生物安全柜中操作,避免雜菌污染?。

  瓷珠取出后不可放回凍存管,單次使用后需滅菌處理?。

  常見誤區?

  錯誤保存溫度?:部分菌種(如銅綠假單胞菌)在4℃易自溶,需根據菌種特性選擇溫度?。

  保護劑濃度不當?:甘油濃度建議10-20%,過高或過低均影響凍存效果?。

  復蘇方法錯誤?:需快速水浴解凍(38-40℃),緩慢復溫會導致冰晶損傷細胞?。

  三、保存效果優化建議

  分裝策略?:單次制備多管分裝,避免反復凍融?。

  定期檢測?:通過涂平板或死活染色法監測菌種存活率,及時復壯退化菌株。

  如需進一步了解特定菌種的保存細節,可參考專業保藏中心的技術規程?。

  注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒

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